You are currently viewing tampão de remoção de anticorpo
antibody stripping buffer

tampão de remoção de anticorpo

Nome: Anticorpo Stripping Solution
Número de catálogo: L7710A, 500ml * GV0480, 500ml 5X
* Reagentes suficientes para 3000 cm2 ou 200-400 tiras de membrana ou 20-40 blots padrão
• Armazenamento: Armazenar em temperatura ambiente (para um armazenamento longo: + 4C °) (L)
● Mercaptoetanol sem cheiro forte. Economize tempo
● A remoção do anticorpo é feita em temperatura ambiente. Nenhum aquecimento de manchas necessário Economiza amostras caras ● Retira os
anticorpos em apenas cerca de 15 minutos em temperatura ambiente Econômico
● O re-bloqueio de manchas pode ser evitado na maioria dos casos

Tampão de remoção de Western Blot

O Western BLoT Stripping Buffer é uma solução para remover anticorpos primários e secundários de membranas de Western blot testadas. A remoção do anticorpo com este tampão pode ocorrer em condições suaves (temperatura ambiente, 30 min de incubação), minimizando a perda de proteína imobilizada da membrana. Ao usar uma membrana de PVDF, a mesma membrana pode ser removida e reexaminada 2 a 5 vezes. Após a remoção, as membranas podem ser sondadas novamente, com uma concentração diferente de anticorpo primário ou com um anticorpo primário totalmente diferente.

antibody stripping buffer
antibody stripping buffer
Gato. # produtos Tamanho Licença Quantidade Detalhes
T7135A Western BLoT Stripping Buffer 500 mL *
O Western BLoT Stripping Buffer é um reagente que pode remover anticorpos primários e secundários de membranas de Western blot. Após o tratamento com o Stripping Buffer, a membrana pode ser reutilizada; é possível sondar a membrana com uma concentração diferente de anticorpo primário ou com um anticorpo primário totalmente diferente. Com este produto, a reação de remoção do anticorpo prossegue sob condições relativamente suaves (temperatura ambiente, 30 minutos) e, portanto, há muito pouca perda de proteína imobilizada da membrana. Ao usar uma membrana PVDF, a mesma membrana pode ser removida e sondada novamente 2–5 vezes.
Buffer de bloqueio Agente de bloqueio luzes Quando usar Formatos disponíveis
Bloco de partida

Proteína purificada simples sem soro e biotina

  • Apresenta um bom desempenho com uma ampla gama de anticorpos e combinações de anticorpos.
  • Compatível com sistemas de estreptavidina
  • Bloqueia em menos de 15 minutos
  • Melhor para proteínas abundantes med-high ou forte afinidade de anticorpos
  • Fundo alto com buffer de bloqueio atual
  • Removendo e repassando western blots
PBS
TBS
PBST
TBST
Blocker FL

Proteína purificada simples

  • Bloqueia o excesso de locais de ligação não específicos para ajudar a reduzir a fluorescência de fundo,
  • Funciona com nitrocelulose e PVDF de baixa fluorescência
  • Sem detergente
  • Bloqueia em 15-30 minutos
  • Western blotting de fluorescência
  • Imagem e armazenamento de manchas de fluorescência secas
10X
Pierce Clear Milk Blocking Buffer

Proteínas do leite clarificadas e estabilizadas

  • Substituição de alto desempenho para tampões de bloqueio de leite caseiro em aplicações de Western blotting
  • Vida útil longa em temperatura ambiente
  • Use quando o fundo alto for visto com leite magro
  • Aplicações fluorescentes e quimioluminescentes
Borato, pH 7,6
SuperBlock

Glicoproteína purificada única livre de soro e biotina

  • A formulação à base de proteínas não contém imunoglobulinas, albumina ou biotina endógena, o que a torna compatível em muitas situações em que os agentes bloqueadores tradicionais falham.
  • Livre de biotina para uso com sistema de estreptavidina
  • Bloqueia em menos de 10 minutos
  • Fundo alto com buffer de bloqueio atual
PBS
TBS
PBST
TBST
Tampão de bloqueio SEA BLOCK

Soro de salmão Steelhead

  • Útil em métodos de detecção envolvendo amostras de mamíferos.
  • Particularmente eficaz em aplicações envolvendo imagens de fluorescência
  • Amostras de mamíferos
  • Western blotting de fluorescência
PBS
Blocker BSA

Albumina de soro bovino purificado

  • Soluções a 10% de albumina de soro bovino de alta qualidade
  • Proteína purificada única fornece menos chances de reação cruzada com componentes de ensaio do que soro ou soluções de leite
  • Use quando tiver como alvo fosfoproteínas
  • Melhor usar ao armazenar anticorpos reutilizados no bloqueador
PBS
TBS
Blocker Casein

Caseína purificada

  • O tampão de bloqueio de proteína única oferece menos chances de reação cruzada com os componentes do ensaio do que soro ou soluções de leite
  • Use quando houver fundo alto com bloqueadores de leite desnatado
PBS
TBS
Blocker BLOTTO

Leite em pó desnatado

  • Solução pronta para usar a 5% de leite em pó desnatado
  • Conveniência – pronto para usar
  • Produto mais consistente do que bloqueadores caseiros
TBS
Sem proteínas

Composto não bloqueador de proteína

  • Minimiza ou elimina a reatividade cruzada associada a tampões de bloqueio baseados em proteínas.
  • As combinações de amostra e anticorpo requerem a eliminação de todas as proteínas animais exógenas possíveis no sistema de ensaio para evitar reação cruzada ou extinção da função de sonda desejada
  • Use quando os bloqueadores à base de proteína causam alto fundo
PBS
TBS
PBST
TBST
Pierce Fast Blocking Buffer

Proteína purificada simples

  • Bloqueia em 5 minutos
  • Quando o tempo é essencial
TBS
SuperSignal Western Blot Enhancer

Tratamento de membrana para anticorpos de baixa abundância ou imunorreatividade baixa

  • Pré-tratamento para membranas de nitrocelulose
  • Reduz a quantidade de anticorpo primário necessário para sondagem
  • Use quando o anticorpo primário for de 3 a 100 vezes menos anticorpo primário do que o normalmente usado para detectar a proteína de interesse
Pronto para usar

 

 

A remoção e nova sondagem de Western blots oferece várias vantagens:

  1. Conservação de amostras caras ou disponíveis apenas em quantidades limitadas;
  2. Análise de um determinado blot usando vários anticorpos diferentes, por exemplo, anticorpos específicos de subtipo ou isoforma;
  3. Reanálise de resultados anômalos e confirmação com o mesmo ou com um anticorpo diferente;
  4. Correção de erros de incubação com o anticorpo errado;
  5. Economia de custo em reagentes e tempo com a reutilização do mesmo blot.

Vários protocolos para remoção de anticorpos de Western blots foram publicados, incluindo aqueles que utilizam baixo pH, calor e detergente e agentes caotrópicos. Três protocolos recomendados são apresentados a seguir. O primeiro é aplicável a qualquer sistema de substrato quimioluminescente e usa uma combinação de detergente e calor para liberar os anticorpos. O segundo é comumente usado para aplicações onde os anticorpos devem ser separados de um antígeno e emprega baixo pH para alterar a estrutura do anticorpo de tal forma que o local de ligação não é mais ativo.

O terceiro protocolo emprega o kit de reciclagem de Western Blot ReBlot ™ Plus, que foi especificamente formulado para remover anticorpos de membranas de Western blot. Os benefícios desta abordagem incluem

  • Evitar odores relacionados ao β-mercaptoetanol.
  • Processamento à temperatura ambiente.
  • Remoção de anticorpos em 15 minutos.

Nenhum desses métodos removerá os precipitados coloridos gerados a partir de sistemas de detecção cromogênica (por exemplo, BCIP, 4CN, DAB e TMB). No entanto, ainda é possível analisar o blot com outro anticorpo específico para uma proteína-alvo diferente.

Normalmente, esses protocolos devem ser usados ​​apenas para fins qualitativos, a menos que tenha sido estabelecido que a remoção não afeta quantitativamente um determinado antígeno. Dependendo do método e do tipo de membrana usada, muitos antígenos resistirão a pelo menos 5 ciclos de remoção. No entanto, deve ser levado em consideração que durante cada ciclo de separação, pequenas porções de proteínas imobilizadas por membrana serão removidas. Quando vários antígenos devem ser detectados sequencialmente, é recomendado começar com antígenos que devem ocorrer em menor abundância ou produzir menos sinal.

Aqui estão algumas recomendações adicionais ao planejar um experimento de Western blot com uma ou mais rodadas de remoção de anticorpos.

  • As membranas de PVDF são mais robustas do que a nitrocelulose e, portanto, são recomendadas para qualquer protocolo que envolva a remoção de anticorpos.
  • A secagem das membranas de PVDF imediatamente após a transferência do gel SDS-PAGE melhora a ligação das proteínas à membrana e é particularmente recomendada quando a extração múltipla é planejada. Membranas de PVDF secas devem ser reumedecidas com álcool antes da primeira rodada de imunodetecção.
  • Detecte primeiro os antígenos de baixa abundância.
  • Use anticorpos de baixa afinidade antes de anticorpos de alta afinidade.
  • Importante:  Embora a secagem de um blot de PVDF seja recomendada imediatamente após a transferência, o blot não deve secar entre as rodadas de imunodetecção. Qualquer molécula residual de anticorpo se ligará permanentemente à membrana se esta secar.

 

WB / Antibody Stripping Buffer

abx090671-200ml 200 ml
EUR 189

West Ez Stripping Buffer

S2100-006 60ml
EUR 81

West Ez Stripping Buffer, Economic Size

S2100-050 500ml
EUR 212

West Ez Stripping Buffer, Economic Size

S2100-100 2x500ml
EUR 280

Western blot recycling stripping buffer, 50 ml (10X)

90101 50 ml
EUR 238

Phospho Antibody Stripping Solution

AKR-102 1 kit
EUR 392
Description: This reagent allows you to strip phospho antibodies from protein blots and subsequently re-probe the same blot.

101Bio WB Stripping Solution

P5W3 - Ask for price

T-Pro Western Blot Stripping Reagent

JB11-K002 500ml/BT
EUR 178

Antibody diluent buffer

AR1106-2 12ml
EUR 91

PBS Buffer

RM00012 2L
EUR 102

10xTaq Buffer

PCRB60 4x1.5ml, 6ml
EUR 58.7

Wash Buffer

KF17356 500 ml
EUR 179

Fixation Buffer

22015 100mL
EUR 149
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 100mL

Permeabilization Buffer

22016 100mL
EUR 149
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 100mL

ADA buffer

AD0003 25g
EUR 64.79

Wash Buffer

abx098952-20ml 20 ml
EUR 91

Coating Buffer

abx098970-1vial 1 vial
EUR 154

Blocking Buffer

abx098972-1vial 1 vial
EUR 154

Lysis Buffer

abx098984-LysisBuffer120ml Lysis Buffer 1 (20 ml)
EUR 154

Lysis Buffer

abx098984-LysisBuffer3100ml Lysis Buffer 3 (100ml)
EUR 230

 

Leave a Reply