Princípio do teste rápido de antígeno COVID-19

O kit de teste rápido de antígeno de coronavírus é um ensaio de fluxo lateral que detecta qualitativamente a presença da proteína do nucleocapsídeo (N) em amostras do trato respiratório superior (swabs nasais). Este ensaio de fluxo lateral foi desenvolvido com o formato de imunoensaio em sanduíche. Quando a amostra é adicionada à almofada de amostra de um cassete de teste, a proteína N do coronavírus se liga ao anticorpo da proteína N SARS-CoV-2 rotulado com ouro coloidal para formar um complexo antígeno-anticorpo (Ab-Ag). O complexo Ab-Ag é capturado pelo anticorpo da proteína SARS-CoV-2 N (anticorpo monoclonal de coelho) ao migrar para a linha de teste sob ação capilar. Uma faixa vermelha aparecerá na linha de teste, o que indica que a amostra é positiva para a proteína do nucleocapsídeo COVID-19. Nenhuma faixa colorida aparecerá na linha de teste se a amostra não contiver nenhum antígeno de coronavírus (proteína N),

1. Torça a tampa do frasco de tampão e dispense cuidadosamente todo o tampão no tubo de extração。 
2. Depois de coletar a amostra respiratória superior com swab nasal, insira o swab no tubo de extração, mergulhe o swab para cima e para baixo no fluido por no mínimo 10 segundos. Segure o cotonete contra o fundo do tubo e gire três voltas. NÃO  espirre líquido para fora do tubo. 
3. Remova a zaragatoa enquanto aperta os lados do tubo para extrair o líquido da zaragatoa. 
4. Pressione a tampa do bico firmemente no tubo de extração. Misture bem girando ou sacudindo o fundo do tubo. 
5. Aperte suavemente o corpo rígido do tubo, dispense duas (2) gotas da mistura tampão-amostra no poço de amostra do cassete de teste de antígeno de coronavírus.
6. Leia os resultados do teste entre  15 e 20 minutos.  Não leia os resultados após  20 minutos.

Estágio 1: Coleta de espécime de esfregaço nasofaríngeo:
1. Colete um espécime de esfregaço nasofaríngeo inserindo o esfregaço estéril na narina.
2. Empurre a zaragatoa estéril até encontrar resistência ao nível da concha.
3. Gire a zaragatoa estéril várias vezes contra a parede nasofaríngea e deixe no local por
10 segundos para saturar a ponta da zaragatoa.
4. Remova a zaragatoa da narina com cuidado.
5. Coloque a amostra de zaragatoa no tubo de tampão de meio de transporte viral e feche bem o tubo.
6. Transporte a amostra de zaragatoa em VTM para o laboratório na cadeia de frio.
7. A amostra pode ser armazenada na temperatura ambiente (abaixo de 30◦C) até 24 horas a partir do momento de
coleta de amostra ou entre 2 – 8◦C por até 48 horas a partir do momento da coleta de amostra.
Etapa 2: Preparação da amostra para teste:
1. A preparação da amostra deve ser realizada em gabinete nível BSL-2 no Laboratório.
2. Misture bem a amostra de zaragatoa no tubo VTM (agite no vórtex durante cerca de 3-5 segundos).
3. Transfira 100 μL do tampão de extração do antígeno VITROS® SARS-CoV-2 para um novo tubo de amostra rotulado. 4. Adicione 400 μL de amostra viral ao tubo acima (para manter a proporção de 1: 4 de tampão de extração: amostra)
5. Misture bem (Tampe / Tampe o tubo de amostra e vortex por aproximadamente 3-5 segundos)
Estágio 3: Processamento de amostra em VITROS ® sistemas:
1. Coloque / carregue o tubo de amostra preparado / extraído no estágio 2, após retirar a tampa do instrumento VITROS® V3600 / V5600 / XT7600; Uma quantidade de 80 μL de amostra extraída é usada para cada determinação.
2. Programe o sistema VITROS 3600 / VITROS 5600 / VITROS XT 7600 para processar as amostras para CV2Ag. O sistema pode ser usado para programar o teste no modo STAT / Random / Batch.
3. O sistema processa as amostras automaticamente usando VersaTips descartáveis ​​para amostras e reagentes para evitar qualquer contaminação cruzada. Os resultados serão entregues em 48 minutos após a aspiração da amostra, na forma de valor S / Co.