Kit de ensaio de peroxidação lipídica (MDA + HNE)

A peroxidação lipídica é um exemplo bem conhecido de dano oxidativo nas membranas celulares, lipoproteínas e outras estruturas contendo lipídios. A modificação peroxidativa de fosfolipídios insaturados, glicolipídios e colesterol pode ocorrer em diferentes reações. Eles podem ser desencadeados por i) espécies de radicais livres, como radicais oxil, radicais peroxil e radicais hidroxil derivados da redução mediada por ferro do peróxido de hidrogênio ou ii) espécies não radicais, como oxigênio singlete, ozônio e peroxinitrito gerado pela reação de superóxido com óxido nítrico.

Malondialdeído (MDA) e 4-hidroxialquenais são subprodutos tóxicos importantes da peroxidação lipídica. Assim, a medição das quantidades de tais aldeídos corresponde a um índice de peroxidação lipídica  in vitro  e  in vivo . 4-hidroxinonenal (4-HNE) é um produto principal da decomposição peroxidativa de ácidos graxos poliinsaturados ω-6 (PUFA). Possui propriedades citotóxicas, hepatotóxicas, mutagênicas e genotóxicas. Além disso, níveis aumentados de HNE foram encontrados no plasma e em vários órgãos sob condições de estresse oxidativo. Na verdade, o MDA é, em muitos casos, o aldeído individual mais abundante resultante da peroxidação lipídica. O  MDA in vitro pode alterar proteínas, DNA, RNA e muitas outras biomoléculas.

O kit de ensaio LPO da Bioquochem   mede as concentrações de MDA e HNE como um índice de peroxidação lipídica. Em primeiro lugar, o ataque catalisado por ácido na posição 3 do anel indol inicia as reações entre indóis e aldeídos (MDA e HNE). Como resultado, esta reação dá um diindolilalcano (cromóforo) com absorbância máxima na região de 580-620 nm.

Em nosso ensaio, um indol (Reagente A) reage rapidamente com MDA e HNE em meio ácido, produzindo um cromóforo (C) com alto coeficiente de extinção molar em seu comprimento de onda de absorção máximo de 586 nm.

 

• Resumo do Produto

  O Kit de Ensaio de Peroxidação Lipídica (MDA) (Colorimétrico / Fluorométrico) (ab118970) fornece uma ferramenta conveniente para a detecção sensível de malondialdeído (MDA).

  No protocolo de ensaio de peroxidação lipídica, o MDA na amostra reage com o ácido tiobarbitúrico (TBA) para gerar um aduto MDA-TBA. O aduto MDA-TBA pode ser facilmente quantificado colorimetricamente (OD = 532 nm) ou fluorometricamente (Ex / Em = 532/553 nm). Este ensaio detecta níveis de MDA tão baixos quanto 1 nmol / poço colorimetricamente e 0,1 nmol / poço fluorometricamente.

  O ensaio MDA também é conhecido como ensaio TBARS.

  Resumo do protocolo do ensaio de peroxidação lipídica:
  – adicionar solução de TBA às amostras e padrões, incubar a 95ºC por 60 min, resfriar em banho de gelo por 10 min
  – transferir para os poços da microplaca
  – analisar com leitor de microplaca
  Para maior sensibilidade, precipite com n-butanol, centrifugar, secar e ressuspender o pellet antes da análise.

  Protocolo chinês disponível.  Consulte a seção de protocolos abaixo.

  Para um ensaio MDA alternativo, sem as etapas de aquecimento exigidas no ensaio TBARS, tente o ensaio MDA ab233471.

  

• Notas

  A peroxidação lipídica refere-se à degradação oxidativa dos lipídios. Nesse processo, os radicais livres retiram elétrons dos lipídios (geralmente nas membranas celulares), resultando em danos às células. A quantificação da peroxidação lipídica é essencial para avaliar o estresse oxidativo. A peroxidação lipídica forma aldeídos reativos como o malondialdeído (MDA) e o 4-hidroxinonenal (4-HNE) como bi-produtos naturais. O malondialdeído (MDA) e o 4-hidroxinonenal (4-HNE) são frequentemente usados ​​como marcadores de peroxidação lipídica e para avaliar o dano oxidativo / estresse oxidativo.

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  Revise o marcador de estresse oxidativo e o guia de ensaio ou o guia de ensaio de metabolismo completo para saber mais sobre ensaios para metabólitos, enzimas metabólicas, função mitocondrial e estresse oxidativo e também como avaliar a função metabólica em células vivas usando seu leitor de placa.

  Veja também o popular 4-HNE Assay Kit ab238538 como um marcador alternativo de peroxidação lipídica e estresse oxidativo.

  
  Como outros pesquisadores usaram o kit de ensaio de peroxidação lipídica ab118970

  O kit de ensaio MDA / TBARs tem sido usado em publicações em uma variedade de tipos de amostra, incluindo:
  – Humano: soro ¹ , extratos de células primárias de hipocampo ² , lisados ​​de células de cultura A375 ³ , amostras de plasma e plaquetas ⁴
  – Camundongo: lisados ​​de células neuronais ⁵ , extrato de tecido do coração ⁶ , plasma ⁷ , extratos de células ⁸
  – Rato: extratos de tecido do hipocampo ⁹ , extratos de cardiomiócitos de células em cultura ¹⁰ , lisados ​​de pulmão ¹¹
  – Porco: soro ¹²

  ^{Referências: 1 – Shen J et al. 2018, 2 – Wang Q et al. 2019, 3 – Luo M et al. 2018, 4 – Mustafa AG et al. 2018, 5 – Murphy K et al. 2018, 6 – Guan F et al. 2019, 7 – Costa CRC et al. 2018, 8 – Eleftheriadis T et al. 2019, 9 – Malekiyan et al. 2019, 10 – Zhou Z et al. 2018, 11 – Li L et al. 12 de 2018 – Lee SE e Kang KS 2019}

• Plataforma

  Leitor de microplaca

Cell Meter™ Fluorimetric Cellular Lipid Peroxidation Assay Kit
22906	AAT Bioquest	200 Tests	EUR 367.2

Lipid peroxidation inhibitor 1
HY-U00319	MedChemExpress	1mg	EUR 1448.4

Cell Meter™ Intracellular Colorimetric Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit
15991	AAT Bioquest	200 tests	EUR 471.6

U-74389G (Lipid peroxidation blocker)
SIH-205-100MG	Stressmarq	100 mg	EUR 208.8
Description: The substance U-74389G is a lipid peroxidation blocker. It is synthetically produced and has a purity of >99%. The pure substance is white solid which is soluble in 25 mg/ml DMSO, and in 20 mg/ml in ethanol; Insoluble in water.

U-74389G (Lipid peroxidation blocker)
SIH-205-500MG	Stressmarq	500 mg	EUR 698.4
Description: The substance U-74389G is a lipid peroxidation blocker. It is synthetically produced and has a purity of >99%. The pure substance is white solid which is soluble in 25 mg/ml DMSO, and in 20 mg/ml in ethanol; Insoluble in water.

Myeloperoxidase (MPO) Peroxidation Activity Assay Kit
K747-100	Biovision	each	EUR 392.4

MicroGram Lipid Assay Kit
LIP1000	ProFoldin	1000 assays	EUR 263.3
Description: This product includes 0.1 ml of 1000 x LIP 10 Dye. It is for measurement of 1000 samples using 96-well plates. Cuvettes may also be used for measurements.

OxiSelect Myeloperoxidase Peroxidation Activity Assay Kit (Fluorometric)
STA-805	Cell Biolabs	192 assays	EUR 692.4
Description: Myeloperoxidase (MPO) is a heme-based peroxidase enzyme responsible for antimicrobial activity against a wide range of organisms. It has also been found to be correlated with increased oxidative stress and decreased levels of catalase activity. The OxiSelect Myeloperoxidase Chlorination Activity Assay Kit is a quantitative, fluorometric assay for measuring the myeloperoxidase peroxidation activity within a sample.

Peroxide Quantitative Assay Kit (Lipid-Compatible)
BSP067	Bio Basic	250Assays, 250preps	EUR 110.11

Lipid Bilayer Permeability Disruption Assay Kit
BPD100K	ProFoldin	100 assays	EUR 325.59
Description: This product includes 1.25 ml of liposomal dye, 1.25 ml of color development solution, 7.5 ml of buffer and 1 ml of DMSO. It is for assays of 100 samples using a 96-well plate.

Cell Navigator™ Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit *Green Fluorescence*
22730	AAT Bioquest	200 Tests	EUR 262.8

Cell Navigator™ Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit *Red Fluorescence*
22735	AAT Bioquest	500 Tests	EUR 262.8

Lipid Droplet Isolation Kit
MET-5011	Cell Biolabs	50 preps	EUR 498
Description: Lipid droplets are lipid rich organelles found in the adipose tissue of eukaryotes. They function to regulate the hydrolysis and storage of neutral lipids and serve as storage for cholesterol and acyl-glycerols. Lipid droplets have also been associated with inflammatory responses, obesity, atherosclerosis, and cancer.

Lipid Quantitation Kit (Colorimetric)
STA-613	Cell Biolabs	100 assays	EUR 637.2
Description: Cell Biolabs? Lipid Quantification Kit measures the lipid content (unsaturated fatty acids only) of samples using the sulfo-phospho-vanillin method, resulting in a simple colorimetric readout amenable to multi-well plate detection.

Lipid Quantification Kit (Fluorometric)
STA-617	Cell Biolabs	100 assays	EUR 637.2
Description: The Lipid Quantification Kit (Fluorometric) uses a fluorometric detection system to quantify neutral lipids in a convenient 96-well microplate reader. The kit includes sufficient reagents for 100 assays.

Frit Kit
FRIT-KIT	Next Advance	1each	EUR 148.8
Description: Kit to create frits in capillaries. Includes formamide, Kasil-1, Kasil-1624 and a cleaving tool.

Column Packing Kit
PACK-KIT	Next Advance	1pack	EUR 1242
Description: Column packing kit for pressure cells. Includes: HPREG regulator, TBNG10 tubing, CAP-75 capillary, and STRB5X2 stir bar.

PCR Mycoplasma Detection Kit
M034-Kit	TOKU-E	Kit	EUR 319.2