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HRP Conjugado Arachis Hypogaea Lectina

Abstrato

A aglutinina de amendoim (Arachis hypogaea) (PNA) é amplamente utilizada como marcador tumoral, pois reconhece fortemente o antígeno T específico do câncer (Galbeta1–> 3GalNAc-), mas não sua versão sialilada. No entanto, uma especificidade adicional para Galbeta1–> 4GlcNAc (LacNAc), que não é específica para o tumor, foi atribuída ao PNA.

Para a interpretação correta dos resultados histoquímicos da lectina, examinamos a especificidade do açúcar PNA usando glicoproteínas de ocorrência natural ou semissintéticas, galactosídeos imobilizados em matriz e glicoproteínas de tecido de ligação à lectina, em vez de mono- ou dissacarídeos como ligantes. Dot-blots, transfer blots ou revestimentos de placa de poliestireno dos glicoconjugados solúveis foram sondados com conjugados de peroxidase de rábano bravo (HRP) de PNA e outras lectinas de especificidade conhecida. As modificações das glicoproteínas de ligação ao PNA, incluindo a remoção seletiva de oligossacarídeos ligados a O e tratamento com glicosidases revelaram que Galbeta1–> 4GlcNAc (LacNAc) foi ineficaz enquanto a galactose ligada a alfa terminal (TAG), bem como o antígeno T exposto (Galbeta1–> 3 GalNAc-) foi excelente como porção de açúcar em glicoproteínas para o seu reconhecimento por PNA. Quando imobilizado, a melibiose foi superior à lactose na ligação ao PNA. Os resultados foram confirmados usando anticorpo anti-alfa-galactosídeo de soro humano específico para TAG.

 

Lectina (PNA) de Arachis hypogaea (amendoim) – HRP

O PNA purificado por afinidade é conjugado com a enzima peroxidase de rábano (HRP). HRP é mais comumente usado para métodos de blotting, imunoensaios e imuno-histoquímica. É uma proteína de 40 kDa que catalisa a oxidação de substratos por peróxido de hidrogênio, resultando em um produto colorido ou fluorescente ou liberação de luz como subproduto da reação. Este produto vem em uma forma líquida estabilizada. Para uso de substrato de detecção de proteína marcada com HRP, oferecemos nosso kit de quimioluminescência intensiva (ICLTM) (SKU: 20810000).

ICL é um substrato de dois componentes que contém uma solução estável de luminol com um intensificador e uma solução tampão de peróxido estável. Tem uma forte emissão de luz e uma sensibilidade ao nível do picograma que é altamente adequada para a detecção rápida de proteínas conjugadas com HRP. As vantagens dos substratos quimioluminescentes sobre outros métodos de detecção incluem múltiplas exposições, os blots podem ser reexaminados, detecta e quantifica uma ampla gama de concentrações de proteínas e produz a maior sensibilidade de qualquer método disponível. Também oferecemos 3, 3, 5, 5-tetrametil benzidina ( TMB, SKU: 42000012) e substrato HRP TMB OneTM (TMB 1) para detecção marcada com HRP.

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TMB é um substrato adequado para o imunoensaio da peroxidase de rábano e é um derivado não cancerígeno da benzidina com uma absorvância a 450 nm. A oxidação de TMB por HRP produz um produto colorido. s TMB 1TM é um substrato de peroxidase de um componente (SKU: 21530073). Substrato HRP de 5-tetrametil benzidina (TMB, SKU: 42000012) e TMB OneTM (TMB 1) para detecção marcada com HRP. TMB é um substrato adequado para o imunoensaio da peroxidase de rábano e é um derivado não cancerígeno da benzidina com uma absorvância a 450 nm. A oxidação de TMB por HRP produz um produto colorido. s TMB 1TM é um substrato de peroxidase de um componente (SKU: 21530073). Substrato HRP de 5-tetrametil benzidina (TMB, SKU: 42000012) e TMB OneTM (TMB 1) para detecção marcada com HRP. TMB é um substrato adequado para o imunoensaio da peroxidase de rábano e é um derivado não cancerígeno da benzidina com uma absorvância a 450 nm. A oxidação de TMB por HRP produz um produto colorido. s TMB 1TM é um substrato de peroxidase de um componente (SKU: 21530073).

Aplicativo

Protocolo geral de Western Blot: 

  • Tamanho da amostra de glicoproteína: 500 ng
  • Concentração de lectina: 0,1ug / ml
  1. Carregar amostras a 500 ng de glicoproteína por pista
  2. Executar gel de página 4-20% Bis-Tris SDS
  3. Transfira o gel para uma membrana PVDF
  4. Bloco de membrana por 1 hora à temperatura ambiente com tampão RIPA (R0278 Sigma)
  5. Incubar lectina HRP a 0,1ug / ml com tampão RIPA por 2 horas à temperatura ambiente
  6. Lavar a membrana 5 x 5 minutos com 25ml de tampão RIPA
  7. Detectar usando substrato quimioluminescente (CPS1-120)

Biochem / Physiol Actions

PNA não aglutina eritrócitos humanos normais, mas aglutina fortemente eritrócitos tratados com neuraminidase. O PNA possui uma potente atividade anti-T semelhante ao anticorpo anti-T no soro humano. A lectina pode ser usada para distinguir entre subconjuntos de linfócitos humanos.

Definição de Unidade

Uma unidade formará 1 mg de purpurogalina em 20 segundos a partir de pirogalol a pH 6,0 a 20 ° C.

Forma física

Contém citrato de sódio

Nota de Preparação

Preparado a partir da peroxidase (P8375) usando uma modificação de um método publicado, que favorece os conjugados de baixo peso molecular. Repurificado após conjugação por cromatografia de afinidade.

 

 

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Cy3

21761088-2 2 mg
EUR 200.92

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Cy5

21761089-1 1 mg
EUR 147.5

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Cy5

21761089-2 2 mg
EUR 258.83

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Pure

21510000-1 5 mg
EUR 81.38

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Pure

21510000-2 10 mg
EUR 128.76

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Pure

21510000-3 50 mg
EUR 335.68

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Ferritin

21510500-1 1 mg
EUR 145.5

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - HRP (Horseradish Peroxidase)

21510927-1 2 mg
EUR 136.34

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Macrobeads

21511047-1 10 mL
EUR 218.05

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Macrobeads

21511047-2 25 mL
EUR 319.79

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Biotinylated

21510020-1 5 mg
EUR 141.75

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Texas Red

21761002-1 2 mg
EUR 139.36

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Texas Red

21761002-2 5 mg
EUR 216.68

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - DyLight 488

21500009-1 1 mg
EUR 211.07

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Semi-Pure

21511382-1 100 mg
EUR 83.08

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - MagneZoom™

20162019-1 1 mL
EUR 73.75

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - MagneZoom™

20162019-2 5 mL
EUR 227.04

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - BlackPearl®

20161008-1 - Ask for price

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - BlackPearl®

20161008-2 - Ask for price

Arachis hypogaea Lectin (PNA) - Colloidal Gold

21510800-1 1 mL
EUR 136.34

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