You are currently viewing Eletroforese de Proteínas
Protein Electrophoresis

Eletroforese de Proteínas

Abstrato

A eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) é uma técnica muito comum usada para análise de misturas complexas de polipeptídeos. Tem grande poder de resolução, é rápido e é adequado para proteínas de pI ácido ou básico. A última é porque a proteína reage com o SDS, que se liga à proteína na proporção aproximada de 1∶4∶1 (SDS: proteína, p / p) e transmite uma carga negativa ao complexo SDS-proteína. Os complexos carregados movem-se em direção ao ânodo quando colocados em um campo elétrico e são separados com base nas diferenças de carga e tamanho. O SDS-PAGE é comumente usado para estimar os pesos moleculares das proteínas, mas as estimativas são aproximadas (sendo denominadas “pesos moleculares aparentes”) e às vezes sujeitas a erros marcantes.

 

Por exemplo, aumentos desproporcionalmente grandes no peso molecular aparente podem ocorrer após fosforilação covalente de uma proteína ( 1 ), ou aprisionamento artificial de ácido fosfórico ( 2 ). A maioria dos projetos de SDS-PAGE emprega um “gel de empilhamento”. Tal sistema permite a concentração de amostras de volumes comparativamente grandes a zonas muito pequenas dentro do gel, dando assim bandas estreitas das diferentes proteínas, que são então melhor resolvidas.

O princípio envolvido nesta concentração de proteína (ou “empilhamento”) é o da isotacoforese. É montado fazendo-se um gel de empilhamento sobre o “gel separador”, que tem um pH diferente. A amostra é aplicada no gel de empilhamento e quando o campo elétrico é aplicado, os complexos carregados negativamente e os íons menores se movem em direção ao ânodo.

 

 

 

 

Protein sequencing
Protein sequencing

 

O que é eletroforese de proteínas?

A eletroforese de proteínas é uma técnica laboratorial padrão pela qual moléculas de proteínas carregadas são transportadas através de um solvente por um campo elétrico. As proteínas e os ácidos nucléicos podem ser separados por eletroforese, que é uma ferramenta analítica simples, rápida e sensível. A maioria das moléculas biológicas carrega uma carga líquida em qualquer pH diferente de seu ponto isoelétrico e irá migrar a uma taxa proporcional à sua densidade de carga. A mobilidade de uma molécula através de um campo elétrico dependerá dos seguintes fatores: força do campo, carga líquida na molécula, tamanho e forma da molécula, força iônica e propriedades da matriz através da qual a molécula migra (por exemplo, viscosidade, tamanho dos poros). A poliacrilamida e a agarose são duas matrizes de suporte comumente usadas em eletroforese. Essas matrizes servem como meios porosos e se comportam como uma peneira molecular. A agarose tem um tamanho de poro grande e é adequada para separar ácidos nucléicos e grandes complexos de proteínas. A poliacrilamida tem um tamanho de poro menor e é ideal para separar a maioria das proteínas e ácidos nucléicos menores.

Existem várias formas de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE), e cada forma pode fornecer diferentes tipos de informações sobre proteínas de interesse. A desnaturação e redução de dodecilsulfato de sódio PAGE (SDS-PAGE) com um sistema tampão descontínuo é a técnica de eletroforese mais amplamente usada e separa as proteínas principalmente por massa. A PAGE não desnaturante, também chamada de PAGE nativa, separa as proteínas de acordo com sua relação massa / carga. O PAGE bidimensional (2D) separa as proteínas por ponto isoelétrico nativo na primeira dimensão e por massa na segunda dimensão.

Trypin for Mass & Sequencing

T9600-025 25ug
EUR 145

Trypin for Mass & Sequencing

T9600-100 100ug
EUR 219

Trypin for Mass & Sequencing

T9600-112 12x100ug
EUR 1657

Trypin for Mass & Sequencing

T9600-400 4x100ug
EUR 651

electrophoresis power supply

EV245 ea
EUR 479

CometAssay Electrophoresis System

4250-050-ES 1 Kit
EUR 2950.8

SequaGel Sequencing System 1L Kit

NAT1136 1KIT
EUR 143

SequaGel Sequencing System 2.2L Kit

NAT1138 EACH
EUR 211

6X6 well Electrophoresis Apparatus

EDK626 1 UNIT
EUR 625.5

Starch (Smithies), for electrophoresis

GE6857-1KG 1 kg
EUR 309

Starch (Smithies), for electrophoresis

GE6857-500G 500 g
EUR 181

Acrylamide, suitable for electrophoresis

GK5651-100G 100 g
EUR 54

ES Horizontal Electrophoresis Set

LE1011 Set
EUR 482

myGel Mini Electrophoresis System

BM0286 System
EUR 618

Agarose for DNA electrophoresis

16-0027-500 500 g
EUR 342

CometAssay Electrophoresis Starter Kit

4250-050-ESK 1 Kit
EUR 3124.4

PCR Clean Up for DNA Sequencing

BT5100 100preps
EUR 95.68

PCR Clean Up for DNA Sequencing

BT5101 1000Preps, 1000prep
EUR 461.08

10-well protein Vertical Electrophoresis Apparatus

EDK692 1 UNIT
EUR 406.26

DNA Library Prep Kit for IIlumina Sequencing

K1475-12 12 Rxns
EUR 480

electrophoresis ps 400v, 500ma, 50w

EV1450 ea
EUR 479

electrophoresis ps 400v, 500ma, 50w

EV1450-UK ea
EUR 479

electrophoresis ps 400v, 500ma, 50w

EV1450-US ea
EUR 479

electrophoresis ps 1500v, 300ma, 150w

EV2230 ea
EUR 749

electrophoresis ps 1500v, 300ma, 150w

EV2230-UK ea
EUR 749

electrophoresis ps 1500v, 300ma, 150w

EV2230-US ea
EUR 749

electrophoresis ps 300v, 1000ma, 150w

EV2310 ea
EUR 572

Leave a Reply